مشخصه سازی پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (g-csf) با استفاده از محاسبه ضریب خاموشی
نویسندگان
چکیده
زمینه و هدف: ضریب خاموشی (extinction coefficient) ، عددی است که برای هر پروتئین منحصر به فرد است و با محاسبه آن می توان نوع و خلوص پروتئین نوترکیب تولید شده در آزمایشگاه ها یا کارخانجات تولیدکننده پروتئین های نوترکیب را ارزیابی نمود. در این مطالعه روشی ساده برای محاسبه ضریب خاموشی پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (g-csf) ارائه می گردد. روش بررسی: پروتئین(g-csf) با غلظت mg/ml 5/0 از آریا تینا ژن تهیه شد. ابتدا روش الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید سدیم دودسیل سولفات برای بررسی میزان خلوص پروتئین به کار رفت، سپس رقت های سریالی الی از پروتئین تهیه شد و با استفاده از طیف سنجی فرابنفش- مرئی میزان جذب نوری آن ها اندازه گیری شد. یافته ها: نتیجه الکتروفورز به صورت تک باندی حدود 18 کیلو دالتون به دست آمد. نتایج حاصل از طیف سنجی فرابنفش- مرئی هر یک از رقت های سریالی به صورت اسپکتروگرام هایی مجزا رسم شد و از آن ها برای رسم منحنی خطی رگرسیون غلظت های استاندارد پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (g-csf) استفاده شد. نتیجهگیری: نتایج بدست آمده در این مطالعه ضریب خاموشی معادل با m-1 cm-1 81/0 را برای پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (g-csf) نشان میدهد که مطابق عدد جهانی گزارش شده توسط تولیدکنندگان بینالمللی این پروتئین و حاکی از درستی روش به کار رفته برای محاسبه این پارامتر فیزیکوشیمیایی است.
منابع مشابه
مشخصه‌سازی پروتئین نوترکیب فاکتور محرک گرانولوسیتی (G-CSF) با استفاده از محاسبه ضریب خاموشی
Background and Objective: Extinction coefficient is the unique value to each protein and can evaluate the type and purity of recombinant protein produced in laboratories and factories producing recombinant proteins. In this study, a simple method for calculating the extinction coefficient of recombinant protein Granulocyte-Colony Stimulating Factor (G-CSF) is presented. Methods: G-CSF with...
متن کاملهمسانه سازی و بیان ایمونوتوکسین نوترکیب با استفاده از توکسین دیفتری و فاکتور محرک رشد کلنی گرانولوسیت
زمینه و هدف: ایمونوتوکسین یک توکسین هدف مند است که از اتصال دو بخش مجزا (بخش ایمنی و بخش توکسینی) با واسط شیمیایی یا پپتیدی اختصاصی تشکیل می شود. هدف اصلی تحقیق حاضر تولید پروتئین هیبریدی و نوترکیب مشتمل بر توکسین دیفتری و فاکتور محرک رشد کلنی گرانولوسیتی است. مواد و روش ها: با توجه به ساختار اولین ایمنوتوکسین تجاری نوترکیب (اونتاک، پروتئین هیبریدی شامل توکسین دیفتری و اینترلوکین 2)، ژن به رمزد...
متن کاملفاکتور رشد عصب، کاربرد بالینی و تولید پروتئین نوترکیب
پروتئینهای خانواده نوروتروفین در پستانداران شامل فاکتور رشد عصب (NGF)، فاکتور نوروتروفیک مشتق از مغز (BDNF)، نوروتروفین-3 (NT-3) و نوروتروفین-4/5 (NT-4/5) هستند که بهعنوان فاکتورهای بقای سلولهای عصبی شناخته شدهاند. فاکتور رشد عصب یکی از مهمترین سیتوکینهاست که از 118 اسید آمینه تشکیل شده است. این فاکتور در رشد و تمایز سلولهای عصبی سمپاتیک محیطی مهرهداران و نورونهای کولینرژیک بازال قدامی...
متن کاملتولید پروتئین نوترکیب gm-csf در باکتری e. coli
فاکتور رشد گرانولوسیتی-مونوسیتی انسانی(gm-csf)، گلیکوپروتیینی با وزن ملکولیkd 477/14 می باشد. ژن gm-csf بر روی کروموزوم شماره 5 انسانی (5q31.1) قرار دارد. این پروتئین باعث تحریک تکثیر و تمایز سلولهای زاینده گرانولوسیت و ماکروفاژ می شود. پروتئین gm-csfانسانی دارای 144 اسید آمینه می باشد که 17 اسید آمینه آن نقش سیگنال پپتید را برای پروتئین ایفا می نمایند. و تعداد 127 اسید آمینه آن به عنوان پروتئی...
15 صفحه اولمقایسه روش‌های مختلف شوک اسمزی در استحصال فاکتور محرک رشد کلونی گرانولوسیت انسانی تولیدشده در پری‌پلاسم
مقدمه: در سال‌های اخیر، علاقه به تولید پروتئینهای ترشحی به علت فواید گوناگون تولید پروتئین نوترکیب در فضای پری‌پلاسمی نسبت به سیتوپلاسم افزایش یافته است. در این میان، پپتیدهای نشانه نقش حیاتی در ترشح پروتئین دارند و نوع روش استفاده‌شده در میزان پروتئین ترشحی استخراج‌شده مهم است. فاکتور محرک رشد کلونی گرانولوسیتی (GCSF) نوعی سیتوکین، هورمون و فاکتور محرک کلونی است که باعث تحریک تکثیر، تمایز و ت...
متن کاملارزیابی بیان فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت نوترکیب انسانی با کدون بهینه شده در دو سویه بیانی اشریشیا کلی Origami وBL21
سابقه و هدف: فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت (G-CSF) به عنوان فاکتور رشد هماتوپوئیتیک می‌‌تواند سلولهای بالغ خونی را تحریک نمایند و امروزه نوع نوترکیب آن در درمان نوتروپنی ناشی از شیمی درمانی سرطان‌های سرکوبگر میلوئید، پیوند مغز استخوان، شیمی درمانی در لوسمی میلوئید حاد و نوتروپنی مزمن و شدید به کار می‌رود. هدف از این مطالعه، مقایسه بیان G-CSF نوترکیب انسانی در دو سویه از اشریشیاکلی بوده است. مو...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله حکیم سیداسماعیل جرجانیجلد ۳، شماره ۲، صفحات ۱۱۷-۱۲۷
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023